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SUPER Green II RNA染料10,000× DMSO溶液

更新時(shí)間:2019-05-09

簡(jiǎn)要描述:

SUPER Green II RNA染料10,000× DMSO溶液
本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。

SUPER Green II RNA染料10,000× DMSO溶液

SUPER Green II RNA染料10,000× DMSO溶液

50 μL¥400
100 μL¥680

本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。

SUPER Green II核酸染料特點(diǎn)

● 無(wú)毒性:屬花箐類染料,容易生物降解,無(wú)致癌毒性。

● 靈敏度高:至少可檢出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25~100倍。

● 信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。

● 操作簡(jiǎn)單:與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中染料不降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。

● 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。

● 使用方便:對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq 酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。 

● 經(jīng)濟(jì):價(jià)格比銀染便宜。

SUPER Green II使用方法簡(jiǎn)介

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

(1) 制膠時(shí)加入SUPER Green II 核酸染料。冷卻膠至50℃左右,每100mL膠中加入3~5μL  SUPER

Green II 10,000× 儲(chǔ)液,以此比例類推。

(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng):

此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量,染料用量相對(duì)較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。

由于SUPER Green II熱穩(wěn)定性較差,不能在熱的膠溶液中直接添加,需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。

2.泡染法

(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

(2) 用pH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000﹕1的比例稀釋SUPER Green II  10,000× 儲(chǔ)液,混勻,制成1× 染色液。

(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上,讓其均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

注:用泡染法染色時(shí),可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。

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