ECL超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體及其關聯(lián)的抗原。其原理是，蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時，顯影定影后蛋白質或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
ECL超敏發(fā)光液的操作方法：
1．按每平方厘米膜面積用配置發(fā)光液：根據發(fā)光液的需要量，取等體積A液和B液，混勻后避光保存?zhèn)溆?；該發(fā)光液必須現配現用。
2.取出膜，平放在干凈的保鮮膜上，膜的正面（蛋白質面）朝上，在膜的中央加適量的配置好的發(fā)光液，溶液向四周迅速擴散，覆蓋所有膜面。室溫保溫5分鐘左右，在此過程中請仔細觀察信號的出現。注意：如果信號強，在暗室中能很快看到陽性信號出現。
3.待信號出現且穩(wěn)定后，用鑷子夾起膜，除去多余的發(fā)光液，平放在干凈的保鮮膜上，膜的正面（蛋白質面）朝上，在轉移膜的上面再覆蓋一層保鮮膜，除去保鮮膜與轉移膜之間的空氣泡，請務必保證保鮮膜是干凈的，不被其他雜物或液體污染。
4.在暗室中，將膜的正面對著X-光片，放入暗盒。第一次曝光時間在1分鐘左右(有經驗的操作者可以根據信號的強弱自行決定)，立即按要求對X-光片進行顯影和定影，確定最佳曝光時間。曝光時間從數秒到數小時不等；特別弱的過夜曝光也可。
